外源嵌合体 T 细胞（CAR-T 细胞），在细胞治疗领域，近几年取得巨大成就。尤其在急性白细胞淋巴白血病治疗方面，取得可喜成绩。CAR-T 细胞治疗效果，关键在于 CAR 的靶向特异性和高亲和性。因此，得到较好特异性和亲和性 CAR 是 CAR-T 细胞治疗的关键因素。

CAR 发展经历不同阶段，根据 CAR 组成元件内容不同，到目前为止发展到 TCR 样抗体。TCR 样抗体，是抗体 FC 片段替换 TCR 受体的结合域部分。相比之前 CAR 而言，其具有更高稳定性。TCR 样抗体研发，关键点是如何找到高亲和力和高特异性的抗体。文献报道，利用抗原 MHC-短肽复合物形式，将 MHC-短肽复合物注射到小鼠体内，通过筛选和优化抗体亲和力，得到最优抗体。

大体分为以下几个步骤：

1）MHC-短肽复合物制备

所用短肽一般为 8~10 个片段短肽，可由短肽合成方法合成。利用软件选择好亲和力较高的 MHC 分子后，在大肠杆菌中表达。将得到的 MHC 单体与短肽亲和，形成 MHC-短肽复合物。

2）MHC-短肽四聚体制备

将所制备的 MHC-短肽复合物，与链霉亲和素交联，制备成 MHC 四聚体。

3）MHC-短肽复合物注射小鼠

MHC-短肽复合物注射小鼠，收集腹水，纯化抗体。

4）抗体亲和力验证

将 MHC-短肽四聚体于 ELISA 板上包被。按照步骤，分别加入纯化后的抗体，和二抗，ELISA 检测吸光值。验证抗体亲和力。

参考阅读：
Anna Sergeeva, Gheath Alatrash, Hong He, et al. An anti–PR1/HLA-A2 T-cell receptor–like antibody mediates complement-dependent cytotoxicity against acute myeloid leukemia progenitor cells. Blood. 2011, 117(16): 4262-72.