• RAS是一种具有GTP酶活性的G蛋白，其基因是肿瘤中最常见的突变基因之一，30%的肿瘤携带RAS变异，算上RAS调控因子和信号通路上下游的变异，几乎覆盖所有肿瘤。KRAS是RAS家族中最常出现的亚型，其基因突变占RAS基因突变总数的85%。随着KRAS G12C小分子抑制剂AMG510（Amgen，1/2期临床）、MRTX849（MiratiTherapeutics，1/2期临床）、BI-2852（BoehringerIngelheim，临床前研究）药物的研发及其相关抗癌数据的公布，使得KRAS成为当前抗癌药物研究的热点。

Reference: Liu P.Y., Wang Y.J., Li X. Targeting the Untargetable KRAS in Cancer Therapy. Acta Pharmaceutica Sinica B., 2019 9(5):871-879.
 

• KRAS突变主要发生在12、13、61、117和146密码子，这些突变位点破坏了KRAS-GTP和KRAS-GDP水解和交换的稳态平衡，导致KRAS持续处于KRAS-GTP状态。在胰腺导管腺癌（PDAC）、结直肠癌（CRC）和非小细胞肺癌（NSCLC）中，12位密码子突变占主导地位，占所有KRAS突变的90%。

Reference：Waters A.M. & Der C.J. KRAS: the Critical Driver and Therapeutic Target for Pancreatic Cancer. Cold Spring Harb Perspect Med 2018; 8: a031435

• 对12位密码子突变分析发现，在NSCLC中， G12C和G12V为最常见的突变；在PDAC中，G12D、G12V、G12R为最常见突变；在CRC中，G12D、G12V、G12C为最常见突变。

 

• Tran er al. 2016从HLA-C*0802转移性结直肠癌患者肿瘤浸润性淋巴细胞中筛选并体外扩培靶向KRAS G12D的CD8+T细胞，将扩培的特异性CD8+T细胞对患者进行回输，在6周和9个月分别进行评估，发现转移灶1、2、4均出现消退，转移灶3在9个月出现反复与肿瘤细胞中HLA-C*0802分子缺失有关。
• 结论：回输靶向KRAS G12D特异性CD8+T细胞，是一种有效的肿瘤免疫疗法。

Reference：Tran E., Robbins P.F., Lu Y.C., Prickett T.D., Gartner J.J., Jia L., Pasetto A., et al. T-Cell Transfer Therapy Targeting Mutant KRAS in Cancer. N Engl J Med. 2016; 375(23): 2255–2262.
 

• Wang et al., 2016在KRAS突变体免疫的HLA-A*1101转基因小鼠中分离到对KRAS G12V及G12D具有高反应性的TCR，转导TCR的PBMC细胞可识别多个KRAS突变的HLA-A*1101肿瘤细胞系；此外，在黑色素瘤、胰腺癌等小鼠模型中进一步验证了KRAS突变体特异性TCR-T细胞具有显著的抗肿瘤效果。

Reference：Wang Q.J., Yu Z.Y., Griffith K., Hanada K., Restifo N.P., Yang J.C. Identification of T-cell Receptors Targeting KRAS-mutated Human Tumors. Cancer Immunol Res. 2016 March ; 4(3): 204–214
 

• 结合KRAS表位肽研究成果【6, 7】，采用抗原表位肽预测算法，针对KRAS常见的突变位点：G12D、G12V、G12C、G12R、G13D，结合中国人群高频HLA-A*1101，设计生产了相应的KRAS MHC-I Tetramer，旨在助力KRAS疫苗、TCR-T等免疫治疗产品研发及治疗后临床疗效评估。

抗原突变位点	MHC分型	多肽序列	位置
KRAS-G12D	A*1101	VVVGADGVGK	7~16
	A*1101	VVGADGVGK	8~16
KRAS-G12V	A*1101	VVVGAVGVGK	7~16
	A*1101	VVGAVGVGK	8~16
KRAS-G12C	A*1101	VVGACGVGK	8~16
	A*1101	VVVGACGVGK	7~16
KRAS-G12R	A*1101	VVGARGVGK	7~16
	A*1101	VVVGARGVGK	8~16
KRAS-G13D	A*1101	VVVGAGDVGK	7~16
	A*1101	VVGAGDVGK	8~16